omega試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗雞IGFBP-4抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的雞IGFBP-4與包被抗體結合，游離的成分被洗去。

　　依次加入生物素化的抗雞IGFBP-4抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗雞IGFBP-4抗體與結合在包被抗體上的雞IGFBP-4結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。

　　加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，雞IGFBP-4濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中雞IGFBP-4的濃度。

　　omega試劑盒的詳細操作過程：

　　1、ADP試劑盒；omega試劑盒使用前請先將試劑盒在室溫下平衡半小時。

　　2、空白孔不加樣，只加顯色劑A，B和終止液用于調零。

　　3、標準品孔：每孔加入稀釋好的標準品50μl，零孔加入標準品/樣品稀釋液50μl，然后加入生物素抗原工作液50μl。

　　4、樣品孔：加入樣品50μl，然后加入生物素抗原工作液50μl。

　　5、輕輕搖晃，蓋上封板膜，37℃培養箱中孵育30min。

　　6、將25倍濃縮洗滌液用蒸餾水25倍稀釋后備用。

　　7、次洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　8、加入50μl親和素-HRP到標準品孔和樣品孔中，輕輕搖晃，蓋上封板膜，37℃培養箱中孵育30min。

　　9、第二次洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　10、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

　　11、終止：每孔加終止液50μl，終止反應。

　　12、測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后10分鐘以內進行。

　　13、計算：omega試劑盒根據濃度和OD值算出標準曲線的回歸方程，建議用計算軟件進行計算，推薦使用ELISAcalc進行計算，擬合模型選用logistic曲線（四參數）。